DNA聚合酶是一種酶類蛋白質，在生物體內發揮著至關重要的作用。以下是DNA聚合酶的主要作用：一、復制DNADNA聚合酶在DNA復制過程中起著核心作用。在細胞分裂前，DNA需要復制以確保每個新細胞都能獲得完整的遺傳信息。DNA聚合酶能夠識別模板鏈上的堿基序列信息，并逐個加入互補的核苷酸，從而合成新的DNA鏈。這一過程遵循堿基互補配對原則，即腺嘌呤（A）與胸腺嘧啶（T）配對，鳥嘌呤（G）與胞嘧啶...
照過紫外線的FBS（胎牛血清）與未照過紫外線的FBS在多個方面存在顯著差異。以下是對這些區別的詳細分析：
成分變化蛋白質變性：照過紫外線的FBS：紫外線照射可能導致FBS中的蛋白質發生變性，這些蛋白質在細胞培養中起著重要作用，如生長因子、激素等。變性后的蛋白質可能失去其生物活性，從而影響細胞培養效果。未照過紫外線的FBS：保持原有蛋白質的結構和活性，為細胞提供必要的營養和支持。核酸損傷...
在生命科學的廣闊領域里，細胞作為生命的基本單位，其代謝活動無時無刻不在進行。而溫度，這一看似簡單卻至關重要的環境因素，對細胞代謝的影響深遠而復雜。本文將深入探討溫度如何作為細胞代謝的隱形調控者，影響細胞的生長、分裂、功能及存活。一、溫度：細胞代謝的“溫度計”細胞代謝是一個復雜而精細的過程，涉及能量的轉換、物質的合成與分解等多個方面。在這個過程中，溫度扮演著至關重要的角色。適宜的溫度范圍（如人...
在現代生物科學研究中，細胞培養技術扮演著至關重要的角色。無論是基礎科學研究，還是藥物研發、基因治療等領域，細胞培養都是不可或缺的一環。而在這一過程中，溫度作為一個關鍵的環境因素，對細胞的生長、代謝和功能具有深遠的影響。本文將詳細探討溫度對細胞培養的影響，以期為相關領域的研究者提供參考。一、適宜溫度下的細胞生長與代謝人體細胞培養的標準溫度通常為36.5℃±0.5℃，而在實際操作中，科學家們更傾...
臍帶間充質干細胞（MSCs）培養基體系是為體外培養和擴增這些細胞而專門設計的。以下是對該培養基體系的詳細解析：一、培養基的基本成分臍帶間充質干細胞培養基的基本成分通常包括基礎培養基和一系列添加劑。基礎培養基提供細胞生長所需的基本營養物質，如氨基酸、維生素、無機鹽等。而添加劑則包括血清（或血清替代物）、生長因子、激素、微量礦物質和抗生素等，它們對于細胞的增殖、分化和維持其特性至關重要。二、常用...
胎牛血清培養基在細胞培養中被廣泛認為是質量好的培養基之一，這主要歸因于以下幾個方面的因素：一、來源純凈，有害物質少胎牛血清取自剖腹產的胎牛，此時胎牛還未接觸外界環境，因此其血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。這使得胎牛血清在細胞培養中能夠提供更為純凈的生長環境，有利于細胞的生長和增殖。二、富含生長因子和營養物質胎牛血清中包含大量的生長因子、激素、蛋白質、氨基酸、碳水化合物、維生素等...
細胞房支原體污染是一個嚴重的問題，可能影響到細胞培養的質量和實驗結果。為了徹底消毒并消除支原體污染，可以采取以下措施：一、物理消毒方法紫外線消毒：利用特定波長的紫外線對空氣、物體表面及水進行消毒。紫外線具有殺菌作用，能夠破壞微生物DNA結構，使其失去活性而死亡。適用于細胞房空氣和物體表面的消毒，但需注意紫外線對人體有一定的傷害性，消毒時應避免人員在場。高溫消毒：將被污染物品置于高于一定溫度的...
在分子生物學實驗中，RNA實驗與DNA實驗相比，普遍被認為更容易受到污染。這一現象背后的原因涉及RNA的化學性質、實驗環境、操作過程以及污染源的多樣性等多個方面。RNA是由核糖核苷酸組成的單鏈分子，而DNA則是由脫氧核糖核苷酸組成的雙鏈分子。這種結構上的差異導致了RNA在降解時更為容易。RNA的單鏈結構使其在面對溫度、pH值、離子強度等環境因素時，更容易受到影響，從而導致降解或變性。這種不穩...
Taq DNA酶，即Taq DNA聚合酶，在基因測序中發揮著重要作用，特別是在Sanger測序和某些基于PCR的測序方法中。以下是Taq DNA聚合酶在基因測序中的具體應用及相關原理：
一、Sanger測序中的應用Sanger測序是一種經典的DNA測序方法，其基本原理是利用DNA聚合酶催化核苷酸按照模板鏈的堿基序列進行延伸，通過終止劑（如ddNTPs）使DNA鏈在特定位置終止，從而產生...
PCR核心酶：Taq DNA聚合酶中文名全稱及作用特點
Taq DNA酶，即Taq DNA聚合酶，是**個被發現的熱穩定DNA聚合酶。以下是對其作用及特點的詳細闡述：
一、作用
Taq DNA聚合酶在分子生物學中的主要作用是作為聚合酶鏈式反應（PCR）的關鍵酶類。PCR技術允許科學家們在體外快速擴增特定的DNA片段，而Taq DNA聚合酶則以其**的性能成為這一過程中的核心成分。它能夠以單...
根據最近的一項研究，腺苷脫氨酶2 （ADA2）已被確定為核酸反應中toll樣受體9 （TLR9）激活的調節因子。ADA2，先前以其催化腺苷脫氨為肌苷的作用而為人所知，被發現在漿細胞樣樹突狀細胞（pDCs）中作為細胞內DNA結合蛋白控制TLR9的激活。這一發現為三種CpG寡脫氧核苷酸（ODNs）之間的功能差異提供了見解，并為調節感染和癌癥的免疫反應提供了潛在的治療策略。ADA2是一種催化活性低...
在細胞實驗中，支原體污染的常見原因多種多樣，主要包括以下幾個方面：一、實驗操作不規范個人衛生問題：實驗人員在操作時如果不注意個人衛生，如未戴手套、口罩等防護用品，或者長時間使用相同的培養工具和耗材而不進行及時清潔和消毒，都可能成為支原體污染源。交叉污染：在細胞培養過程中，不同細胞系之間的交叉污染是一個重要的污染原因。重復使用移液器、手套等實驗工具而不進行適當的消毒和清潔，容易導致支原體的傳播...
PCR（聚合酶鏈反應）是一種在體外擴增特定DNA片段的分子生物學技術，具有靈敏度高、特異性強、操作簡便等優點，被廣泛應用于生命科學研究的各個領域，包括細胞實驗室內支原體污染的檢測。以下是對PCR檢測細胞實驗室內支原體污染的詳細闡述：一、PCR技術的基本原理PCR技術的基本原理是利用DNA聚合酶在特定的溫度條件下，以DNA模板、引物和脫氧核糖核酸為原料，通過變性、退火和延伸三個步驟的循環，使目...
在PCR實驗中，特別是實時熒光定量PCR（qPCR）實驗中，內參基因起著至關重要的作用。以下是內參基因在PCR實驗中的具體作用：一、校正實驗誤差內參基因的表達相對穩定，通過將目標基因的表達量與內參基因的表達量進行比較，可以校正實驗過程中的誤差，這些誤差可能來源于樣本制備、RNA提取、反轉錄以及PCR擴增等步驟。例如，在定量PCR實驗中，通過測定目標基因和內參基因的Ct值（循環閾值），利用相對...
來自RCSI醫學與健康科學大學的新研究解釋了身體內部時鐘如何影響免疫系統的炎癥過程。研究結果描述了被稱為巨噬細胞的免疫細胞在一天中的不同時間如何不同地工作，并可能為關節炎等炎癥性疾病的定時靶向治療鋪平道路。研究人員探索了免疫系統和人體晝夜節律（通常被稱為生物鐘）之間的聯系。巨噬細胞是一種檢測有害物質并對其作出反應的免疫細胞，它能夠通過組裝被稱為炎癥小體的大型復合物來觸發炎癥，作為一種防御機制...
在細胞轉染過程中，縮減培養基用量和提高轉染濃度是兩個需要仔細平衡的操作，以確保轉染效率的同時不對細胞造成過大的毒性影響。以下是一些建議，以幫助實現這一目標：一、縮減培養基用量選擇適當的培養基：使用無血清或減血清培養基，如Opti-MEM，可以減少血清對脂質體和核酸復合物形成的影響，同時保證轉染過程中的營養供給。優化轉染條件：在轉染過程中，盡量減少培養基的用量，但要保持足夠的體積以確保細胞能夠...
在細胞培養及分子生物學實驗中，細胞DNA殘留是一個不容忽視的問題。它不僅可能源自細胞培養過程中的宿主細胞DNA污染，還可能來自實驗器材、操作者、空氣或水等環境中的DNA顆粒。這些殘留的DNA片段可能對實驗結果產生顯著影響，甚至誤導科研結論。本文旨在探討細胞DNA殘留對相關細胞實驗的影響，并提出相應的應對策略。 一、細胞DNA殘留對實驗結果的影響 1. 誤導實驗結果： DNA污染可能...
細胞支原體qPCR（定量聚合酶鏈式反應）檢測方法的驗證是一個確保實驗準確性和可靠性的重要步驟。以下是對該驗證過程的詳細闡述：
一、驗證目的
驗證細胞支原體qPCR檢測方法能否準確、快速地檢測細胞中的支原體污染，以及該方法的靈敏度和特異性是否滿足實驗要求。
二、驗證步驟
樣本準備：
收集疑似被支原體污染的細胞樣本，以及支原體陰性和陽性的對照樣本。
對樣本進行適當的處理，如稀釋、提取...
如果細胞被支原體污染，其消亡時間并不是固定的，而是受到多種因素的影響。以下是對這一問題的詳細分析：一、支原體污染對細胞的影響支原體污染會對細胞產生多方面的負面影響，包括生長抑制、細胞病變、代謝和功能影響等。這些影響會導致細胞增殖速度減慢，甚至停止，嚴重時可能導致細胞死亡。然而，支原體污染并不一定會立即導致細胞消亡，而是需要一個相對較長的過程。二、支原體污染后細胞的消亡時間污染程度：支原體污染...
2024年12月16日，生命科學學院劉亮教授團隊在《Nucleic Acids Research》期刊上在線發表了題為“DNA target binding-induced pre-crRNA processing in type II and V CRISPR-Cas systems”的研究論文，**揭示了靶標核酸的結合能夠激活CRISPR-Cas系統效應蛋白對pre-crRNA的反式切割...
進行細胞支原體檢測實驗時，需要注意以下幾個方面以確保實驗的準確性和可靠性：一、實驗前準備樣本采集與處理： 確保樣本的采集符合無菌操作規范，避免交叉污染。樣本應在采集后盡快進行檢測，如需保存，應選擇合適的保存條件（如溫度、濕度等），并避免反復凍融。 試劑與材料：使用高質量的試劑和材料，確保無支原體污染。試劑應在使用前進行充分解凍和混勻，避免使用過期或變質的試劑。 二、實驗操作無菌操作：在整個實...
核酸雜交技術是一種基于核酸互補配對原理的技術，以下是對其原理及應用的詳細闡述：一、原理核酸雜交技術的原理是核酸變性和復性理論。具體來說，雙鏈的核酸分子在某些理化因素（如加熱、極端pH值等）作用下會解開成單鏈，而在條件恢復后又可依堿基配對規律（即Watson-Crick堿基配對原則：A-T、C-G）重新形成雙鏈結構。這一過程中，互補的核苷酸序列（DNA與DNA、DNA與RNA、RNA與RNA等...
質粒DNA的提取實驗是分子生物學實驗中的一項基礎且關鍵的操作。以下是進行質粒DNA提取實驗時需要注意的幾個方面：一、實驗前準備確保菌體密度合適：在進行質粒提取之前，應確保菌體密度處于對數生長期（OD600值約為0.6~1.0），此時細菌代謝活性高、細胞膜完整性較好，適合裂解操作。試劑準備：所有使用的試劑，如裂解液、洗滌緩沖液等，應新鮮配制并避免長時間放置，以防止pH值波動或試劑失效。同時，所...
在PCR（聚合酶鏈式反應）中，引物和模板DNA不是同一條DNA。它們各自扮演不同的角色，并共同協作以擴增特定的DNA序列。模板DNA：這是PCR反應中需要擴增的原始DNA序列。模板DNA可以是任何來源的DNA，如基因組DNA、質粒DNA或病毒DNA等。在PCR過程中，模板DNA首先被加熱變性成單鏈，然后引物與其互補序列結合，從而開始DNA的復制。引物：引物是人工合成的、與模板DNA特定區域互...
PCR（聚合酶鏈式反應）引物在PCR反應過程中起著至關重要的作用。以下是PCR引物在PCR反應過程中的主要作用：導向作用：引物能夠特地結合到目的DNA序列上，為DNA聚合酶提供一個起始點，并引導DNA聚合酶從引物的3'端開始合成新的DNA鏈。這種導向作用保證了PCR反應的高特異性，避免了非目標序列的擴增。引物與模板DNA的互補序列結合后，為DNA聚合酶的起始合成提供了一個定位點。起始復制：在...
